کیت C3 به روش SRID – بهار افشان

مقدمه

C3 یکی از پروتئین‌های اساسی سیستم کمپلمان است که نقشی کلیدی در پاسخ ایمنی بدن ایفا می‌کند. این پروتئین توسط کبد تولید شده و در پلاسما خون و برخی بافت‌ها حضور دارد. C3 در حالت غیرفعال وجود دارد و از طریق مسیرهای زیر فعال می‌شود:

مسیر کلاسیک

مسیر آلترناتیو

مسیر لکتین

عملکرد C3

هنگام فعال‌سازی، C3 به دو بخش C3a و C3b تقسیم می‌شود:

C3a: به عنوان آنافیلاتوکسین فعالیت دارد و سلول‌های ایمنی را به محل عفونت جذب می‌کند.

C3b: در فرآیند اپسونیزاسیون نقش دارد و پاتوژن‌ها را جهت تخریب توسط فاگوسیت‌ها علامت‌گذاری می‌کند.

تنظیم دقیق فعالیت C3 برای جلوگیری از آسیب به بافت‌های بدن ضروری است. پروتئین‌های تنظیم‌کننده مانند عامل H و عامل I فعالیت C3 را کنترل می‌کنند.

دلایل کاهش و افزایش C3

کاهش سطح C3

کاهش سطح پروتئین C3 ممکن است نشانه بیماری‌های مختلف باشد:

بیماری‌های خودایمنی: بیماری‌هایی مانند لوپوس، آرتریت روماتوئیدی یا بیماری کرون ممکن است سطح C3 را کاهش دهند.

عفونت‌های شدید: مصرف سریع کمپلمان در پاسخ ایمنی بدن به عفونت‌های باکتریایی، به‌ویژه عفونت‌هایی مانند نیسریا، می‌تواند به کاهش سطح C3 منجر شود.

گلومرولونفریت: شرایطی که در آن سیستم کمپلمان بیش‌ازحد فعال شده و باعث آسیب به کلیه‌ها می‌شود.

بیماری‌های کبدی: اختلال در تولید C3 به دلیل بیماری‌های شدید کبدی مانند سیروز.

افزایش سطح C3

افزایش سطح C3 معمولاً به عملکرد بیش‌فعال سیستم ایمنی بدن اشاره دارد:

عفونت‌ها: پاسخ سیستم ایمنی در برابر عفونت‌ها ممکن است سطح C3 را افزایش دهد.

بیماری‌های التهابی مزمن: مانند کولیت اولسراتیو، که با التهاب سیستمیک همراه است.

سرطان‌ها: در برخی موارد سرطان، سیستم کمپلمان به‌طور فعال علیه سلول‌های سرطانی پاسخ می‌دهد.

کیت‌های تشخیصی C3

کیت‌های تشخیصی C3 برای اندازه‌گیری دقیق سطح این کمپلمان در محیط‌های بالینی و تحقیقاتی طراحی شده‌اند.

کیت‌های مبتنی بر ELISA

کیت‌های ELISA امکان اندازه‌گیری حساس و دقیق سطح C3 در نمونه‌های سرم یا پلاسما را فراهم می‌کنند. این کیت‌ها از آنتی‌بادی‌های اختصاصی برای اتصال به C3 استفاده می‌کنند. پس از اتصال، سیگنال رنگی تولید می‌شود که می‌تواند با اسپکتروفتومتر خوانده شود.

روش SRID برای سنجش C3

Single Radial Immunodiffusion (SRID) یکی از روش‌های کلاسیک و کمی برای اندازه‌گیری سطح C3 پروتئین در نمونه‌های بیولوژیکی است.

مراحل انجام SRID

آماده‌سازی ژل: ژل آگار با آنتی‌بادی‌های اختصاصی C3 تهیه می‌شود.

ایجاد چاهک‌ها: نمونه‌های سرم در چاهک ژل قرار داده می‌شوند.

انتشار کمپلمان در ژل: C3 در ژل منتشر شده و با آنتی‌بادی‌ها واکنش نشان می‌دهد.

تشکیل حلقه رسوب: حلقه‌هایی در ژل شکل می‌گیرند و قطر هر حلقه نشان‌دهنده غلظت C3 در نمونه است.

اندازه‌گیری: قطر حلقه‌ها با استفاده از مقیاس استاندارد اندازه‌گیری می‌شود.

مزایای SRID

دقت بالا: مناسب برای اندازه‌گیری سطوح کمپلمان در نمونه‌های مختلف.

عدم نیاز به تجهیزات پیشرفته: انجام آزمایش SRID نسبتاً ساده و کم‌هزینه است.

محدودیت‌ها

زمان‌بر بودن: نسبت به دیگر روش‌های مدرن مانند ELISA، SRID بیشتر زمان نیاز دارد.

تاثیر دقت بر کیفیت ژل: کیفیت ژل ممکن است بر نتایج اثرگذار باشد.

جمع‌بندی

C3 یکی از اجزای حیاتی سیستم کمپلمان است که نقش مهمی در ایمنی ذاتی بدن دارد. کاهش یا افزایش سطح این پروتئین می‌تواند نشانه‌ای از اختلالات ایمنی یا بیماری‌های دیگر باشد. استفاده از کیت‌های تشخیصی مانند ELISA یا روش SRID کمک شایانی به تشخیص بیماری‌ها و تحقیقاتی در زمینه سیستم کمپلمان می‌کند. اندازه‌گیری دقیق سطح C3 به پزشکان در تصمیم‌گیری درمانی، پایش بیماری و بهبود نتایج بالینی کمک می‌کند.