معرف MRVP – بهار افشان

مقدمه

معرف MRVP که در واقع به دو تست جداگانه به نام‌های Methyl Red (MR) و Voges-Proskauer (VP) اشاره دارد، یک ابزار کلیدی در میکروب‌شناسی است که برای شناسایی توانایی تخمیر قندها و نوع فرآورده‌های تخمیری تولیدشده توسط میکروارگانیسم‌ها استفاده می‌شود. این تست‌ها بیشتر در شناسایی و تفکیک اعضای خانواده انتروباکتریاسه (Enterobacteriaceae) به کار می‌روند.

کاربردهای MRVP در میکروب‌شناسی

تست Methyl Red (MR)

این تست برای سنجش توانایی باکتری در تولید محصولات تخمیر اسیدی پایدار مانند اسیدهای استیک، لاکتیک و فرمیک از تخمیر گلوکز استفاده می‌شود.

اصل تست

باکتری‌هایی که مسیر تخمیر گلوکز را به سمت تولید اسیدهای پایدار طی می‌کنند، محیط کشت را به شدت اسیدی می‌کنند. معرف Methyl Red (یک معرف اسید-باز) با افزودن به محیط کشت، در pH کمتر از 4.4 به رنگ قرمز درمی‌آید (نتیجه مثبت)، اما در pH بالاتر از 6.2 زرد دیده می‌شود (نتیجه منفی).

کاربرد

شناسایی باکتری‌هایی مانند Escherichia coli که محصولات تخمیر اسیدی پایدار تولید می‌کنند.

تست Voges-Proskauer (VP)

این تست برای شناسایی توانایی باکتری در تولید فرآورده‌های تخمیر غیر اسیدی مانند استواَین (Acetoin) یا مشتق آن، بوتاندیول، طراحی شده است.

اصل تست

باکتری‌هایی که گلوکز را تخمیر می‌کنند اما محصولات نهایی کمتر اسیدی (مانند استواین) تولید می‌کنند، در حضور معرف باریت (Barritt’s reagent) (شامل α-نفتول و KOH)، رنگ قرمز-صورتی در محیط ایجاد می‌کنند که نشان‌دهنده نتیجه مثبت است.

کاربرد

شناسایی باکتری‌هایی مانند Enterobacter cloacae و Klebsiella species که مسیر تخمیر بوتاندیول را دنبال می‌کنند.

تفاوت نتایج MR و VP

این دو تست به طور مکمل برای تفکیک و شناسایی میکروارگانیسم‌ها استفاده می‌شوند، زیرا باکتری‌هایی که نتیجه مثبت در تست MR دارند معمولاً نتیجه منفی در تست VP نشان می‌دهند و بالعکس.

روش انجام آزمایش MRVP

کشت اولیه: میکروارگانیسم را در محیط کشت مایع مناسب (مانند MR-VP broth) که حاوی گلوکز است، کشت داده و لوله‌ها را در دمای 35-37°C به مدت 24 تا 48 ساعت انکوبه کنید.

تست MR

5 قطره از معرف Methyl Red را به یکی از لوله‌ها اضافه کنید. تغییر رنگ قرمز در محیط نشان‌دهنده یک تست مثبت (تولید اسیدهای پایدار) است. اگر رنگ محیط زرد بماند، نتیجه تست منفی است.

تست VP

به لوله دیگر، 10 قطره محلول α-نفتول و 10 قطره محلول KOH بیفزایید. لوله را به آرامی مخلوط کرده و اجازه دهید لوله به مدت 15-20 دقیقه در دمای محیط بماند. مشاهده رنگ قرمز یا صورتی رنگ نشان‌دهنده نتیجه VP مثبت است (تولید استواین). نبود تغییر رنگ یا رنگ قهوه‌ای نشان‌دهنده نتیجه منفی است.

اهمیت تست MRVP

تشخیص افتراقی باکتری‌ها: این دو تست به طور خاص برای شناسایی اعضای خانواده انتروباکتریاسه و تشخیص تفاوت بین گونه‌هایی مانند E. coli و Enterobacter استفاده می‌شوند.

تفکیک Pathogen‌ها: به کمک تست MRVP می‌توان به تشخیص پاتوژن‌های روده‌ای و بررسی توانایی تخمیر میکروارگانیسم‌ها در عفونت‌های گوارشی کمک کرد.

تحقیقات در متابولیسم باکتریایی: آزمایش MRVP به پژوهشگران امکان مطالعه مسیرهای تخمیری و تحلیل متابولیسم ارگانیسم‌ها را می‌دهد.

جمع‌بندی

معرف MRVP در واقع شامل دو معرف جداگانه برای دو تست مکمل (MR و VP) است که برای تشخیص مسیرهای متابولیسمی تخمیر گلوکز استفاده می‌شود.

تست MR مشخص می‌کند که آیا میکروارگانیسم اسیدهای پایدار تولید می‌کند یا خیر.

تست VP توانایی تولید ترکیبات غیر اسیدی (مانند استواین) را بررسی می‌کند.

این تست ساده اما پرکاربرد، یکی از ابزارهای استاندارد در آزمایشگاه‌های میکروب‌شناسی است و نقش مهمی در تشخیص عوامل عفونی و تحقیقات باکتریایی ایفا می‌کند.