محیط BHI یا عصاره قلب و مغز براث (آماده مصرف) – بهار افشان

مقدمه

محیط کشت Brain Heart Infusion (BHI) Broth یکی از محیط‌های مغذی و قدرتمند است که به‌طور گسترده در میکروبیولوژی برای رشد طیف متنوعی از میکروارگانیسم‌ها از جمله باکتری‌ها، قارچ‌ها و برخی از میکروب‌های سخت‌ رشد استفاده می‌شود. در این مقاله، اطلاعات مربوط به ترکیبات، ظاهر، کاربردها و نحوه استفاده از این محیط کشت را بررسی می‌کنیم.

ترکیبات محیط BHI Broth

محیط کشت BHI Broth یک فرمولاسیون غنی دارد که شامل ترکیبات زیر است:

عصاره قلب و مغز: این دو مؤلفه اصلی، به‌عنوان منبع پروتئین، آمینو‌اسیدها، ویتامین‌ها و مواد معدنی ضروری برای رشد انواع میکروب‌ها عمل می‌کنند. عصاره مغز و قلب پایه‌ای برای تأمین نیتروژن، ویتامین‌ها، مواد معدنی و آمینو‌اسیدها هستند و به رشد میکروارگانیسم‌های سخت رشد کمک می‌کنند.

پپتون: به‌عنوان منبع اصلی نیتروژن عمل می‌کند و قادر به تأمین نیازهای پروتئینی برای باکتری‌ها است.

گلوکز: یک منبع کربوهیدرات است که انرژی لازم برای تکثیر میکروارگانیسم‌ها را فراهم می‌کند.

کلرید سدیم: یک ترکیب مهم برای حفظ فشار اسمزی در محیط است.

فسفات دی‌سدیم: به‌عنوان بافر عمل می‌کند تا pH محیط را تثبیت کند.

خون گوسفند (به‌صورت انتخابی): گاهی 10٪ خون دفیبرینه گوسفند به آن اضافه می‌شود تا برای کشت ارگانیسم‌های خاص (مانند Histoplasma capsulatum) و قارچ‌های بیماری‌زا مفیدتر باشد.

ظاهر محیط کشت

محیط BHI Broth معمولاً به صورت یک مایع زرد روشن و شفاف ارائه می‌شود. ظاهر آن پس از رشد میکروارگانیسم‌ها تغییر می‌کند و معمولاً کدر می‌شود. هنگامی که با آگار ترکیب شود، به‌صورت محیط جامد برای جداسازی کلنی‌ها به‌کار می‌رود.

کاربردهای آزمایشگاهی و تحقیقاتی

کشت و نگهداری میکروارگانیسم‌ها

این محیط برای رشد طیف وسیعی از باکتری‌ها و قارچ‌ها، از جمله موجودات سخت رشد (fastidious organisms)، استفاده می‌شود.

ایزوله‌سازی ارگانیسم‌های بیماری‌زا

محیط BHI برای جداسازی ارگانیسم‌های پاتوژنیک مانند Streptococcus pneumoniae، Listeria monocytogenes و سایر ارگانیسم‌هایی که نیاز به مواد مغذی خاص دارند، ایده‌آل است.
همچنین، افزودن خون به محیط امکان جداسازی ارگانیسم‌های قارچی مانند Histoplasma capsulatum را فراهم می‌کند.

تست‌های حساسیت آنتی‌بیوتیک

محیط BHI به‌عنوان محیط پایه برای بررسی فعالیت آنتی‌بیوتیک‌ها و تست‌های حساسیت دارویی استفاده می‌شود.

تحقیقات ژنتیکی و میکروبیولوژیک

به‌دلیل توانایی بالا در حمایت از رشد چندین نوع باکتری در شرایط مختلف، برای تحقیقات بر روی مقاومت آنتی‌بیوتیکی یا رفتار میکروارگانیسم‌ها ایده‌آل است.

مدیریت شرایط بی‌هوازی

این محیط در کشت باکتری‌های بی‌هوازی نظیر Clostridium spp. و دیگر میکروارگانیسم‌های حساس به اکسیژن کاربرد دارد.

نحوه استفاده

آماده‌سازی محیط

مقدار مشخصی از پودر محیط BHI Broth را طبق دستورالعمل روی بسته با آب مقطر مخلوط کنید (معمولاً 37 گرم در ۱ لیتر آب مقطر). محلول را حرارت دهید تا کامل حل شود و سپس در دما و فشار مناسب (اتوکلاو 121 درجه سانتی‌گراد به مدت 15 دقیقه) استریل کنید. در صورت تهیه این محیط بصورت آماده از برند بهارفشان، نیاز به این مرحله نیست.

کشت نمونه

نمونه میکروبی مورد نظر را به محیط اضافه کنید و به آرامی تکان دهید. برای کشت میکروارگانیسم‌های بی‌هوازی، از لوله‌های درپوش‌دار یا سیستم‌های مخصوص بی‌هوازی استفاده کنید.

انکوباسیون

لوله‌های کشت‌شده در دمای مناسب (معمولاً °37‌ سانتی‌گراد برای اکثر باکتری‌ها) انکوبه می‌شوند. رشد میکروارگانیسم‌ها با مشاهده کدورت یا تغییرات ظاهری در محیط مشخص می‌شود.

مزایا و محدودیت‌ها

مزایا

غنای بالای مواد مغذی، مناسب برای ارگانیسم‌های سخت رشد.

چندمنظوره بودن (قابل استفاده به‌صورت مایع و جامد).

مناسب برای محیط‌های هوازی و بی‌هوازی.

محدودیت‌ها

برخی از آلاینده‌های غیرهدف می‌توانند در این محیط رشد کنند، که نیاز به شرایط استریل دقیق دارد.

امکان رشد ارگانیسم‌های ناخواسته در صورت عدم مدیریت صحیح نمونه وجود دارد.

نتیجه‌گیری

محیط Brain Heart Infusion (BHI) Broth یکی از محیط‌های استاندارد و قدرتمند در میکروبیولوژی است که به دلیل غنای مواد مغذی، کاربرد گسترده‌ای در آزمایش‌های بالینی و تحقیقات میکروبیولوژی دارد. این محیط نه تنها برای رشد اکثر میکروارگانیسم‌ها ایده‌آل است، بلکه به‌عنوان پایه‌ای برای اصلاح یا طراحی محیط‌های تخصصی دیگر نیز به کار می‌رود.