سوش استاندارد هموفیلوس آنفلوانزا ATCC 9006 – بهارافشان

مقدمه

Hemophilus influenzae ATCC 9006 یک سویه استاندارد و شناخته‌شده توسط مجموعه American Type Culture Collection (ATCC) است، که به‌گونه‌ای طراحی شده است تا در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی به‌عنوان منبع استاندارد برای کنترل کیفیت و کاربردهای تحقیقاتی استفاده شود. این سویه از تیپ بی‌کپسول (Non-Typeable/Non-Capsulated) هموفیلوس آنفلوانزا (NTHi) محسوب می‌شود، و کاربرد ویژه‌ای در مطالعات پاتوژنز، کنترل کیفی محیط‌های کشت، و آزمایشات حساسیت دارویی دارد.

ویژگی‌های کلیدی هموفیلوس آنفلوانزا ATCC 9006

نوع سویه

Non-Typeable Hemophilus influenzae (NTHi): این سویه فاقد کپسول پلی‌ساکاریدی است و با سویه‌های تیپ‌دار (مانند H. influenzae type b یا Hib) که عامل عفونت‌های شدیدتر هستند، تفاوت دارد. سویه‌های غیرکپسوله (تحت عنوان NTHi) معمولاً باعث عفونت‌های موضعی مانند اوتیت میانی، سینوزیت، و گاهی اوقات عفونت‌های تنفسی می‌شوند.

کاربرد خاص در کنترل کیفیت

در کنترل کیفی محیط‌های کشت انتخابی برای رشد هموفیلوس آنفلوانزا (مانند CHOC یا محیط‌هایی حاوی فاکتور X و فاکتور V) و تست‌های حساسیت آنتی‌بیوتیکی به کار می‌رود. استفاده از این سویه استاندارد به آزمایشگاه‌ها این امکان را می‌دهد که از عملکرد صحیح محیط‌ها و آزمایشات اطمینان پیدا کنند.

تمایز

نیازمند فاکتور X (همین) و فاکتور V (NAD) برای رشد است. این خاصیت برای شناسایی این باکتری در محیط‌های آزمایشگاهی استفاده می‌شود. در محیط آگار خوندار معمولی (Blood Agar) بدون رشد است و تنها در Agar Chocolate (CHOC) یا محیط‌های مکمل‌شده با فاکتورهای X و V رشد می‌کند.

شکل کلنی‌ها

روی محیط CHOC Agar: کلنی‌های کوچک، محدب و شفاف با لبه‌های صاف.

ویژگی بیوشیمیایی

Gram-negative coccobacilli (کوتاه و میله‌ای شکل).

بی‌هوازی اختیاری و فاقد توانایی حرکت.

کاربردهای اصلی سویه ATCC 9006

کنترل کیفیت محیط‌های کشت

از این سویه برای تأیید عملکرد محیط‌های کشت انتخابی که برای رشد Hemophilus influenzae طراحی شده‌اند، استفاده می‌شود:

Chocolate Agar (CHOC): مناسب‌ترین محیط برای رشد هموفیلوس آنفلوانزا.

Levinthal Agar: محیطی حاوی فاکتورهای V و X.

Mueller-Hinton Agar (با افزودنی‌های فاکتور X و V): برای انجام تست‌های حساسیت آنتی‌بیوتیکی.

Haemophilus Test Medium (HTM): محیط استاندارد برای تست حساسیت ضد میکروبی.

آزمایش‌های حساسیت آنتی‌بیوتیکی

سویه ATCC 9006 به‌طور روتین در تست حساسیت آنتی‌بیوتیکی (Antibiotic Susceptibility Testing, AST) آزمایشگاهی استفاده می‌شود.

استاندارد CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) این سویه را برای کالیبراسیون روش‌های تست MIC (Minimum Inhibitory Concentration) و دیسک دیفیوژن (Disk Diffusion) تأیید کرده است.

شناسایی و ارزیابی روش‌های مولکولی

این سویه به‌عنوان الگوی استاندارد برای بررسی توالی DNA یا طراحی تست‌های PCR مرتبط با هموفیلوس آنفلوانزا به‌ویژه گونه‌های غیرکپسوله (NTHi) به کار می‌رود.

مطالعات پاتوژنز

مناسب برای تحقیقات مرتبط با مکانیسم‌های بیماری‌زایی هموفیلوس آنفلوانزا غیرکپسوله در عفونت‌های تنفسی مزمن، اوتیت میانی حاد و سینوزیت.

محیط‌های کشت استاندارد برای سویه ATCC 9006

الف) جهت رشد اولیه و کنترل کیفیت:

Chocolate Agar (CHOC):

مکمل‌شده با فاکتورهای V و X.

مناسب‌ترین محیط برای رشد و کشت اولیه این سویه.

Levinthal Agar:

مشابه CHOC Agar، اما بیشتر در مطالعات تحقیقی استفاده می‌شود.

Nutrient Agar همراه با فاکتور V و X:

برای تأیید نیاز باکتری به فاکتورهای خاص در رشد.

ب) برای تست‌های حساسیت دارویی:

Haemophilus Test Medium (HTM):

این محیط به عنوان معیار طلایی برای انجام تست حساسیت آنتی‌بیوتیکی Hemophilus influenzae مطرح است.

Mueller-Hinton Agar (MHA):

فقط در صورتی که با فاکتور V و X مکمل شود، برای هموفیلوس کاربرد دارد.

ج) برای تشخیص سریع:

از سویه ATCC 9006 برای ارزیابی صحت محیط‌های مدرن‌تر مانند کیت‌های chromogenic یا محیط‌های سریع مولکولی استفاده می‌شود.

مزایای کنترل کیفیت با ATCC 9006:

تست صحت محیط کشت

تأیید عملکرد بهینه محیط کشت از نظر فراهم‌کردن نیازمندی‌های رشدی (فاکتورهای X و V).

دقت در تست‌های حساسیت دارویی

استفاده از سویه استاندارد برای ارزیابی داروهای آنتی‌بیوتیکی به تنظیم پروتکل‌های صحیح آزمایشگاهی کمک می‌کند.

یکپارچگی در روش‌های تشخیصی

ایجاد امکان اعتبارسنجی روش‌های مولکولی (مانند qPCR) و تست‌های سرولوژیکی.

ملاحظات مهم در کار با سویه ATCC 9006

شرایط نگهداری

باید در دمای مناسب (-20°C یا کشت زنده در 4°C) و روش‌های توصیه‌شده ATCC نگهداری شود.

الزامات ایمنی زیستی (Biosafety Level)

1. influenzaeیک پاتوژن مرتبط با انسان است و برای کار با سویه ATCC 9006، رعایت استانداردهایBSL-2 ضروری است.

شناسایی آزمایشگاهی

استفاده از روش‌های شناسایی بیوشیمیایی و میکروسکوپی مانند نیاز به فاکتورهای رشد (X و V) و رنگ‌آمیزی گرم برای ویژگی‌های سلولی.