کیت هموگلوبین (درابکین) همراه با استاندارد – بهارافشان

مقدمه

کیت هموگلوبین درابکین یکی از ابزارهای مهم در آزمایشگاه‌های تشخیص طبی برای اندازه‌گیری غلظت هموگلوبین در نمونه‌های خونی است. این کیت بر اساس روش استاندارد سیان‌مت‌هموگلوبین (Cyanmethemoglobin) طراحی شده و یکی از دقیق‌ترین و رایج‌ترین روش‌های آزمایشگاهی برای ارزیابی مقدار هموگلوبین در خون محسوب می‌شود.

اصول عملکرد کیت درابکین

روش سیان‌مت‌هموگلوبین بر اساس تبدیل انواع هموگلوبین موجود (اکسی‌هموگلوبین، کربوکسی‌هموگلوبین، و مت‌هموگلوبین) به ترکیبی پایدار به نام سیان‌مت‌هموگلوبین طراحی شده است. در این روش:

-خون با معرف درابکین واکنش داده و انواع هموگلوبین موجود به سیان‌مت‌هموگلوبین تبدیل می‌شوند.

-شدت رنگ ایجاد شده توسط سیان‌مت‌هموگلوبین در طول موج 540 نانومتر توسط دستگاه‌های اسپکتروفتومتر اندازه‌گیری می‌شود.

-غلظت هموگلوبین موجود در نمونه خون بر اساس شدت رنگ و طبق منحنی استاندارد محاسبه می‌شود.

ترکیب معرف درابکین

معرف درابکین مخلوطی از مواد شیمیایی است که به تثبیت واکنش و ایجاد رنگی پایدار کمک می‌کنند:

پتاسیم سیانید (KCN): باعث تبدیل هموگلوبین به سیان‌مت‌هموگلوبین می‌شود.

پتاسیم فری‌سیانید (K3[Fe(CN)6]): تسهیل‌کننده اکسیداسیون هموگلوبین به مت‌هموگلوبین.

دیونیزه آب: محیط واکنش فراهم می‌کند.

ویژگی‌ها و مزایای کیت درابکین

دقت بالا: این روش به‌عنوان روش مرجع برای بررسی هموگلوبین توسط WHO شناخته شده است.

پایداری: سیان‌مت‌هموگلوبین ترکیب پایداری است که امکان قرائت دقیق غلظت هموگلوبین را فراهم می‌کند.

سازگاری: قادر به اندازه‌گیری تمامی شکل‌های هموگلوبین موجود در خون است.

سادگی و سرعت: این کیت فرایندی ساده و سریع برای اندازه‌گیری غلظت هموگلوبین ارائه می‌دهد.

کاربردهای کیت درابکین

تشخیص کم‌خونی: غلظت هموگلوبین برای تشخیص انواع کم‌خونی‌های ناشی از فقر آهن، بیماری‌های مزمن یا کمبود ویتامین‌ها استفاده می‌شود.

ارزیابی سلامت عمومی: بررسی سطح هموگلوبین بخشی از آزمایش‌های روتین خونی در چکاپ‌های عمومی است.

مطالعات بالینی: در پژوهش‌ها و آزمایش‌های مربوط به بیماری‌های خونی استفاده می‌شود.

روش انجام تست هموگلوبین با کیت درابکین

مواد و تجهیزات مورد نیاز:

-معرف درابکین (Drabkin’s Reagent).

-نمونه خون (معمولاً به صورت خون کامل ضدانعقاد شده با EDTA).

-اسپکتروفتومتر با طول موج 540 نانومتر.

-استاندارد هموگلوبین (برای تنظیم دستگاه و منحنی کالیبراسیون).

مراحل انجام تست

تهیه محلول: معرف درابکین را آماده کنید (طبق دستورالعمل سازنده).

اضافه کردن خون: حجم مشخصی از خون (معمولاً 20 μL) را به محلول درابکین (معمولاً 5 میلی‌لیتر) اضافه کنید.

مدت زمان واکنش: نمونه به مدت 5 تا 10 دقیقه در دمای اتاق قرار داده شود تا واکنش به‌طور کامل انجام شود.

اندازه‌گیری: نمونه را در دستگاه اسپکتروفتومتر قرار دهید و جذب نوری را در طول موج 540 نانومتر اندازه‌گیری کنید.

محاسبه: غلظت هموگلوبین بر اساس منحنی استاندارد تعیین می‌شود.

محدودیت‌ها

سمیت سیانید: معرف درابکین حاوی مقدار کمی سیانید است که می‌تواند خطرناک باشد، بنابراین نیاز به رعایت نکات ایمنی دارد.

خطاهای دستگاهی: تنظیم دقیق اسپکتروفتومتر برای به دست آوردن نتایج معتبر ضروری است.

تداخلات: برخی مواد موجود در نمونه ممکن است با واکنش سیان‌مت‌هموگلوبین تداخل کنند.

جمع‌بندی

کیت درابکین یکی از ابزارهای قابل اعتماد در آزمایشگاه‌های بالینی است که دقت بالا و سازگاری با انواع هموگلوبین را فراهم می‌کند. این کیت به ویژه در تشخیص و مدیریت کم‌خونی بسیار مورد استفاده قرار می‌گیرد. با این حال، رعایت نکات ایمنی هنگام کار با معرف سیانید، ضروری است.